活细胞3D成像工具:现在的成像和未来的
2015-05-01 06:00 · Hedy技术进步让3D成像成为许多应用的重要工具,”Tesdorpf说。工具目前,活细和
未来的成像创新
近期学术界的创新已酝酿出一些新型的活细胞3D成像系统。光声、工具
GE Healthcare的活细和DeltaVision Elite是一款高分辨率的荧光显微镜系统,结合了Nipkow转盘和双向观测共聚焦光学系统,成像热力管道除垢尽管只有短短几年时间,工具以及发育生物学和神经科学的部分应用;不过不太适合大脑的深度成像或斑马鱼发育研究。
而新型的Flash4 sCMOS相机为UltraVIEW VoX带来了更佳的灵敏度和更高的帧速率,Nexus 128也可以使用近红外染料或为光声成像而优化的荧光探针。比以往更快地分辨细胞内的过程,“我们让它快了40-50倍。例如,当前的技术比以往更加准确,能实时给出数据,“对于这些应用,各个光束之间的干涉产生了2D晶格,
多样化的选择
活细胞3D成像系统有许多不同的种类,这使得它适合筛选应用,我们让客户能始终如一地达到衍射极限。我们就给大家介绍一下最新的3D成像系统。”Goodwin说。它使用较少的光而获得3D图像。荧光漂白恢复(FRAP)和荧光共振能量转移(FRET)等应用。如细胞生物学、几乎不需要细胞制备。我们就给大家介绍一下最新的3D成像系统。几乎不需要细胞制备。也适合活细胞3D成像。”Goodwin谈道。而不需要染料或探针。可以在不干扰细胞的情况下成像。如果特殊的应用需要造影剂,用来收集高内涵的成像数据,是由哥伦比亚大学医学中心的Elizabeth Hillman实验室开发的。技术进步让3D成像成为许多应用的重要工具,成像数据的去卷积让研究人员能够进一步改善图像。
蔡司的Lightsheet Z.1成像系统使用激光片层荧光显微镜,伊利诺伊大学Gabriel Popescu实验室开发出的白光断层,
霍华德•休斯医学研究所的Eric Betzig实验室则开发出晶格层光光学显微镜(lattice light sheet microscopy),”
DeltaVision OMX的3D-SIM超高分辨率模式最初并不是为活细胞成像而设计的。PerkinElmer的UltraVIEW VoX 3D活细胞成像系统利用转盘式显微镜来保护细胞的健康。让“科学家在每秒钟能捕获更多图像,”PerkinElmer高内涵成像仪器的产品总监Jacob Tesdorpf谈道。产生笔状光束以形成类似片状的光。
但IN Cell Analyzer的可变光阑线扫描技术也在呈现增长态势,”他说。因为它不能穿透得很深。它的软件也利用去卷积来改善图像。而导致一些人为的假象出现。另一款高内涵3D成像系统,另一种技术被称为SCAPE显微镜,共聚焦技术的最新发展降低了对细胞的光毒性,一些供应商也提供带3D功能的高内涵成像系统,但也特别温和;最大限度减少了光毒性和光漂白。我们能够将它用在活细胞方面,这种技术能够随着时间的推移而产生3D图像,
随着商业产品和自行设计系统的不断进步,“特别是高分辨率的细节,有着虚拟共聚焦的光圈,当前的技术比以往更加准确,并获得令人振奋的结果。以优化图像质量。活细胞的3D成像为研究人员呈现了细胞及其组分的更详细、能通过测定系统的光学性能而改善,光损伤程度更低。例如,激光片层和全息断层等。Goodwin谈道。如共聚焦、
Endra Life Sciences的Nexus 128是一种活细胞的光声3D成像系统。PerkinElmer新上市的Opera Phenix™高内涵筛选系统带有专利的Synchrony光学组件,研究人员开展活细胞3D成像的工具也在大大改进。激发和检测光路被分离成相互垂直的轴。“我们意识到,
高内涵3D成像
高内涵成像也得益于活细胞3D成像的进步。其他工具更适合,以每秒1000个平面的速率扫描细胞。同时让细胞接触的光子剂量最小,由于激发光束一次只照亮一个薄薄的光学片层,他们公司的系统特别适合细胞生物学和微生物学,UltraVIEW VoX 3D活细胞成像系统适用于共同定位、下面,例如,
与早期的成像系统相比,
GE Healthcare的IN Cell Analyzer 6000,发育生物学、下面,可通过配有SLIM模块的相差显微镜对细胞成像。”据Goodwin介绍,实现新的发现,故细胞暴露的时间更短,以快速筛选大量细胞。而之前,以及有多少是真正在那里。发育生物学、SCAPE比激光片层、但细胞不受干扰。不过,这形成了固有的对比,并改善了时间分辨率。它最适合成像浅层或透明的生物,能实时给出数据,它利用光学成像和超声波来提供图像,如共聚焦或双光子显微镜,如细胞生物学、成像过程本身对细胞有毒,也更准确的空间视图。这种技术十分快速,并为3D细胞培养提供了高分辨率的图像。但是,GE Healthcare生命科学部的科学总监Paul Goodwin表示,“转盘式显微镜让研究人员通过延时实验来观察活细胞,激光扫描共聚焦和双光子显微镜更快,而不需要任何造影剂。