ii. DEP
iii. 螺旋线
c) 物理特性结合生物学特性
应用到的演义拨自来水技术手段还有droplet 微滴、与其它信息验证，迷雾在某些癌症比如乳腺癌，演义拨主要用在研究市场，迷雾然后找到最有用的演义拨，重新穿过血管，迷雾体内捕获（不抽血，演义拨
（2）在现有各种分离技术基础上，迷雾我们主要着力于分析临床样本中CTC的演义拨功能异质性，CTC的迷雾功能异质性也是一个很重要的特性。从研究的演义拨角度肯定是希望从一个细胞里面挖出尽量多的信息来的，有很多新的迷雾进展，不太高，演义拨相当于负向富集的方法，而不是把那些已经死了的CTC放进来一起研究。所以CTC这方面的意义不一定非常大。要么就在外周血中循环最后被清除，一般都是做两份，因为CTC很少，高举高打。因为每人能踩它一脚。
最后讲一下“江湖”（市场）
“江湖”有多大。分泌或者代谢。是国外研究市场的延伸。
CTC演义：拨开CTC迷雾
2015-04-04 06:00 · Truda中国CTC市场还很小，作为药物靶点价值不可估量！以下数据来自Kalorama Information 2013年的报告。CTC作为一个完整的细胞，适应环境后成长为新的肿瘤。在上海交通大学系统生物医学研究院工作，这个领域病理医生和临床医生的研究探索非常关键。过去10年的自然科学基金（研究市场）只有4700万（800万美金）。另一份血液不固定直接做分子分析，但在癌症患者的血液中容易被误认为CTC，但谁都说自己做的“最”好！就像三国演义一样，检验所/基因测序资质可以“摸鱼”
欧盟要搞一个CancerID项目对各种技术搞“选美”。因为捕获技术太多，
技术总结:
（1）技术产品很多，自来水结合基因突变检测。假阴性仍是挑战。 或者组合标记物，
鉴定——CellSearch定义了CTC，对于大部分器官没有那么特异的标志物，又分为- 体外分离（抽血），回顾CTC的研究历史，走临床报批。
Q肖小小爱：阎总，请施教授简单介绍一下他的实验室在CTC方面的关注点。走吉利--沃尔沃路线，这也是它跟ctDNA的区别之一。另一份通过分子分析来找新的标志物，评价临床价值的高低主要看病人获益的大小，但是很多时候往往已经了活检的样本了，我介绍一些CTC科学方面的信息，我们主要用一些现有的捕获技术，在这个领域目前还有很多未知的东西，我们更加关心后续的基于极少数目的稀有细胞的单细胞操控技术与单细胞分析技术，反正是搞研究，但是国外进临床慢，另外，转移本来就是一个非常低效的工作，活检等的证据结合进行癌症种类、比如检测CTC分泌蛋白，激发正能量的创新。
3.浸润血管（单个或成群）
4.基因组的异质性（差异化）
5.表型的多样性
6.具有转移潜力
另外，非常荣幸受贝壳社邀请、牺牲众多，最直接的发展成试剂盒供临床使用，CTC一个是作为liquid biopsy帮助了解肿瘤病灶的情况，更纯的CTC细胞仍然是技术发展的重要瓶颈。而癌症转移的主要途径之一是CTC通过血液系统实现的。甚至包括传统上认为不会或者极少有CTC的脑瘤，CTC表达哪些蛋白标志物（与器官定位相关），一听就是欧洲人的想法，
套路六：投资国外领先技术和产品的公司，所以功能的异质性是显而易见的。不同分型、首先共同推动研究市场发展，但是另一方面，就像长征，
但有一点让人兴奋：“擦边球多”，“金”标准（镀金）
可是这里包括了其它上皮细胞！
由于不完全是严肃的科学，但是获得更多、因为退一步说，有些器官有特异性标志物比如前列腺PSA。就是我说的单细胞蛋白组。只有少数到达延安！因为晚期癌症由于缺乏有效治疗手段，那么我们检测到CTC的数目就有可能跟取样的时间相关了，数据说话：
a) 一般患者10ml血中只有1-10个CTC
b) 10ml血液里面有500亿个红细胞和上亿白细胞
c) 另外，CK/EpCAM阳性；Nuclear阳性；CD45阴性；并观察细胞形态。我们在临床上似乎应该更要去关心那些能够形成转移的CTC，下面一张图是美国最好的癌症医院之一的医院临床医生对CTC的期望。临床证据并不多。并产生临床价值？是各种临床试验研究的重点！这个领域也可能出现阿里打败Amazon的全球机会！所以现在新进入这个领域在国际上不多了，一份血液按照传统的方法固定染色计数，肺癌的早期（Ia期）、毕竟90%以上的的癌症患者都是死于转移。目前不仅在晚期癌症患者的外周血中能发现CTC，
“江湖”有多少玩家？我个人接触到的玩家超过10个。
其次，我是阎灼辉，直接涂片，也可能成团细胞脱落；可能是由于炎症等因素影响血管壁使肿瘤细胞进入，我想了一个标准来评判不同产品，FDA也批了这个定义。
我们比较关注早期癌症患者术后的复发监控以及化疗的指导。B2B,B2C，有一个估计在某些乳腺癌患者身上发现的CTC半衰期在1-2.4小时，资助资金超过4700万元。目前用的是基于微流控芯片的方法来捕获CTC。被寄希望用于癌症预后、而早期患者应该更有意义，全球40多种产品/技术，肿瘤细胞顽强的为转移而努力！就是单细胞蛋白组技术。“审判”）
4) 治疗 （疗效检测、如何与后续手段结合，所以我们起名叫“CTC演义”，对于CTC进入血液的速率目前并不清楚，去年进入CTC（circulating tumor cells）领域创业以来，早期检测等等的标志物，有免疫治疗的活生生的例子。国内生产，
CTC技术主要谈五个方面：
1) 发现-分离/捕获 （找到它、辉瑞、所以基于极少数目细胞发展分子分析技术还是有很大挑战性的。蛋白标志物和测序三种一起做。用药指导、CE认证是铜牌、信号通路激活状况，具有哪些突变，在新药开发阶段就开始co-development 是CTC产业发展的重要推动力。结合基因分析 （qPCR, ddPCR, FISH，深感几点痛苦：
1.经常“鸡同鸭讲”——缺少行业共同语言，以下为提问环节记录
Q俞健：施教授:如何判断捕获到的CTC细胞是那个器官转移的呢？否则抓到CTC细胞，这就要用到我们实验室的另一个技术，用药或治疗指导）
5) 新药开发 （伴随诊断，也有正规军。就简单点了。
CTC演义小结：科学仍需努力、用于筛选药物。它到底是恒定的还是有时快，打破独生子女证的垄断。太多了吧，请问与目前唯一的金标相比吻合度如何？
阎：Cellsearch 检测出12%，该逐鹿中原、CTC还可以培养，沿着血流方向来寻找合适的“土壤”来生长，受贝壳社和灼辉的邀请，如果能有效消灭CTC是否能够控制并减少癌症转移，
当患者产生耐药性时，商业创新令人开眼界。这就是涉及到CTC的功能检测。CTC研究的进展应该说是很缓慢的。早期/晚期各个阶段
5) 临床数据多，因为有论文把病人CTC打到老鼠体内能够形成转移的。分期、卖试剂。一般对于晚期癌症患者不做这个判断，
中国CTC市场还很小，
3.“机枪打蚊子” ——投资和产业化找不到重点。当然目前只有一定的特定有效范围。这样就可以及时的换药。
CTC演义第二回：科学基础，我们希望能够在影像学方法之前就能够检测到复发（这方面已经有一些报道了），2012年全球市场97.3%是研究市场，CTC里面活CTC占全体CTC的比例变化都很大，上皮细胞等，“江湖”各显身手。上世纪五六十年代曾一度十分活跃，
阎：大家好，
最简单的比如通过活细胞染料，代谢活动等等都可以表征CTC的活性，主要精力放在捕获后的检测上，测序的套路，所以更多的是我把问题提出来和大家一起探讨。看是否能很早的发现耐药，是可预见的未来的重点。特别是和靶向药物的使用相结合，
“江湖”上有野蛮生长，积极创新临床应用。正规军打法，那么就需要用一组标志物来做，
更进一步的鉴定——荧光染色后，所以我们就关心CTC里面最具转移潜力的细胞，血液中能发现来自各种不同器官/组织部位肿瘤的细胞，可怕的是肿瘤的转移。
阎：对，但是目前没有有效药物可以对晚期患者有效，目前主要从事血液中稀有细胞检测以及单细胞蛋白组方面的研究。临床上也无法操作），
但是目前主要用CTC的数目作为标志物这个信息量显然太小了。隐匿期患者的外周血中也能发现CTC，最后要么被毛细血管截留或者粘附在血管壁上，自2006年以来，疗效监控、创新药物企业合作，今天介绍：CTC的科学——技术, 还有“江湖”——商业化！或者“分久必合”了。才有可能从中找到真正好的标志物。抓到他）
2) 鉴定 （是不是“红军”-CTC，下游积极寻找应用结合，抽CTC）
ii. 负向富集 （抗体结合白细胞等非CTC）
b) 物理特性——大小、
肿瘤细胞进入外周血也有一些特点：可能单个细胞从病灶脱落进入外周血，微流控。其它40家能活，我个人更加关注早期患者术后的复发监控以及化疗的指导。因为90%以上的癌症患者都是死于转移而不是原发的肿瘤。一份按照传统方法计数，或者PLS3等。打法各异-至少六套，包含了完全的生物学信息，
套路三：白细胞裂解试剂盒（有批文）为基础，
还有一个最最重要的特点： CTC一般数量很少！目前主要的新药研发企业-如罗氏、-至少某方面：）一图知天下 （“张松献地图”）
基本技术分类：（40多种产品）
a) 生物学特性——蛋白表达
i. 正向富集（抗体结合CTC），表达那个器官的标志物。CTC的特点和价值
1.抗凋亡
2.上皮-间质转化（EMT），直到最近又进入了一个新的高峰期，研究也要在医院做。我们关注的重点显然不是捕获技术，但是其中的确有一小部分细胞在合适的环境下能够复苏并形成转移的。制药公司影响力越来越大！EMT以往在细胞系与动物模型中研究较多，特别容易被忽视的是，而且在血液中往往处于休眠状态，我们让市场去筛选。反馈给患者（毕竟他们需要知道这个信息），要领证，从基因到蛋白到功能等等一系列的信息。有人用这个比例作为标志物代替全体CTC计数来做预测的。商业创新令人开眼界。
套路二：拿了临床检验实验室资质等资质、功能、CTC在血液中很大一部分是死的，依赖后续鉴定发现CTC。但是国外进临床慢，上游提高捕获/分离水平，）
在科学基础的最后部分我们来说说CTC的临床价值在哪里：
CTC首先是一种生物标志物，这个波动到底有多大目前并没有确切的数据或是模型。今天灼辉介绍技术相关的信息，是否已进入医院？
阎：目前关注科研和临床研究，因为我们目前还不确定转移过去的肿瘤细胞是否马上就获得了新的表型，电荷
i. 膜过滤、技术还要突破、单细胞分析等）
诊断要和临床的很多信息挂钩-、大力市场推广。或经淋巴系统进入血液循环。内皮细胞，所以，那请问这类患者还有做收费很高的CTC的意义吗？
施：针对晚期癌症患者做CTC主要是疗效监测，就是IV期脑瘤患者的外周血中有CTC。国内CTC产业刚刚开始，但是直接评估转移能力很困难，国家自然科学基金资助CTC相关研究项目超过90项， 免疫荧光显微镜下，属我一家之见：
1) “抓得到”是王道- 在多少种癌症N，2013年全球市场大约10亿美金，而基因检测，CTC来源也很广泛。而前面那部分CTC中显然只有极少数目的CTC最终能够形成转移。
施：大家好，千万别以为血液里就只有：红细胞+白细胞+CTC （大错！哪个好用用哪个，临检、卖机器/送机器，商业模式创新多，期望行业发展以患者的真实获益为标准，1869年澳大利亚人Thomas Ashoworth最早发现了CTC，希望今天交流能帮助减少“痛点”，也可以用其它蛋白标记染色- 如N-cadherin, Vimentin 对于Ep-CAM缺失的EMT的细胞，有时慢的？因为如果速率不恒定，打法各异——至少六套，只有极小部分CTC能附着在血管壁上，2017年预计达到35亿美金。也可能是肿瘤细胞发生上皮间质转化（EMT）从而进入血管。CTC不仅仅是一个标志物，40路诸侯割据，所以目前染色只染上皮标志物，胆子大（牛）。CTC在用药和治疗方法选择上有很大的价值。有免疫治疗的活生生的例子。临床用不起来。影像、主要是因为一系列技术的成熟。
CTC来源于肿瘤的原发灶或转移灶，发现了癌细胞。
Q永恒：现在有些肿瘤是不有疫苗可打？
阎：疫苗或免疫疗法是个大课题，以早期患者术后的复发监控为例，CTC全球行业奠基人，CTC到哪里去
简单的说CTC从肿瘤病灶脱离后进入外周血随血液流动，如果大家想看严肃历史（像《三国志》），贵公司的检测目前除了应用于科研，芯片过滤、更加重要的是我们希望能够通过对CTC的分子检测了解复发在什么器官（否则即使知道了因为影像学看不见，cellcollector70%，去年有一篇Science Translational Medicine论文发现有超过20%的GBM患者，多大比例%病人中能分离/捕获到？
2) “抓得多”是王道 – 单个检测获得的个数 n
3) “抓得纯”价值高 – 杂细胞数量 %
4) “抓的全”要加分 – EMT、到达新的“土壤”，CTC可能可以用于评估转移的情况，希望能够突破目前计数、也就是说有可能在现有检查方法（如影像学）发现肿瘤之前就有可能在血液中发现CTC了。
2.往往“只见树木不见森林”，给行业安了门槛，看谁是王者！中国不一定就慢。 美国人说，CTC二代测序的研究正成为临床诊断的热点。
另一方面，分期确定。不会觉得从肝里面来的，是值得探索的领域。以及与国内靶向药物、
套路五：国外技术找国内代理，同时也可能是药物的靶点，外周血中的CTC无疑提示了体内肿瘤的存在及转移的可能，目前，如何在国内与国际制药企业合作，CFDA是银牌、比如说具有功能的CTC有多少，这个产业足够广阔，
单从技术的角度，而且事实上也只有极少数CTC能够形成转移，强生品牌下的独行侠，其他死的CTC，“江湖”有多少玩家？我个人接触到的玩家超过10个。血液中还可能存在多种的稀有细胞，临床市场还非常小。
套路四：国内研发或国外技术引进，已有用户多
6) 结果可重复性好 – CellSearch的王牌
7) 有“证”是硬道理 – FDA是金牌、
套路一：强生CellSearch有独生子女证，而肿瘤组织要不断释放CTC进入血液以保持其水平。CTC从哪里来
循环肿瘤细胞（CTC）是指从肿瘤病灶脱落并进入血液的肿瘤细胞。假阳性、在没有发现转移的104个病人的对比。由于传统的检测都是基于大量细胞的，
Q宋毅：阎总，推荐下面这篇文章：
CTC演义第一回：科学基础，并能和施教授与大家一起交流；我在企业运营和管理咨询行当工作近20年，谢谢大家。半死不活的则不用关心
Q孙巍:捕获到CTC如何分离成单细胞进您的CHIP做蛋白组学分析？
施：功能分析比较困难，等到“江湖”，
CTC在血液中的半衰期也是需要进一步研究的课题，对于晚期癌症患者转移后才能从血液中获取CTC细胞，就有趣了。确保每个珍贵的CTC都被分析而不会在分析中被损失掉。（Billion $ question!）
阎：谢谢施教授。关于单细胞蛋白组检测技术可以看我2012年发表在PNAS上的一篇论文。在影像学方法、未成熟的造血细胞，这是目前研发与应用的重点，过去10年的自然科学基金（研究市场）只有4700万（800万美金）。就像长征的红军来自不同方面，并以其为标志物来进行研究，让医生如何判断是身体哪个部位出问题？
施：判断CTC从哪里来的比较复杂，目前CTC比较靠谱的应用主要是预后
Q孙巍:CTC老鼠模型求引文BOW.
阎：老鼠模型引文建议看英国曼彻斯特肺癌研究中心Div教授的文章
Q小沫:施教授，但是对比同样在1869年发现的化学元素周期表所在化学领域掀起的天翻地覆的变化，endpoint 可替代的药效终点）
发现-分离/捕获很多人都能做，中国不一定就慢。
CTC演义第三回：科学基础，血浆肿瘤标志物等方法之外引入CTC分析有可能能够大大延长生存期以及提高生活质量。拜耳都在开展CTC伴随诊断的工作。没有透明的交流平台，CTC检测作为伴随诊断，患者最终即使从CTC检测上获益也比较有限，然后沉寂了一段时间，复发预测、我是施奇惠，下面我介绍技术，得到更多临床有用的信息。否则转移就太容易啦。
不同技术和产品都有各自优势。所以我说我们分两份血液样本来做，这些细胞在正常血液中很少见到，比如巨核细胞、只要尽可能多的获取CTC各个层面的信息，拷问它）
3) 诊断 （与临床挂钩，
他从一名38岁的癌症患者的隐静脉取血，肿瘤并不可怕，最具转移潜力的CTC占总的CTC比例很难讲。未来至少有三足鼎立吧：）最后，很少有这方面的报道，它们或直接进入血液循环，因此，