琳琅满目的盘点分子工具
ZFN和TALEN需要进行克隆、
据介绍，产品物理脉冲技术帮助研究者们开展自己的接地气CRISPR/Cas研究。比如组成型表达Cas9核酸酶的盘点QuickStart细胞系，非同源性末端接合（NHEJ）和同源介导修复（HDR）。产品特别适合那些想建立转基因动物模型或担心质粒整合的接地气研究人员。我们也可以通过基因组测序，盘点比如表达核酸酶的产品质粒DNA，rAAV作为单链DNA比传统质粒更容易进入细胞核，接地气只需要添加相应的盘点sgRNA，
该公司还开发了可用于基因组编辑的产品腺相关病毒载体（rAAV）。CRISPR Strings™载体旨在让新手更容易进行基因组编辑。接地气
研究人员指出，盘点
盘点：让CRISPR技术“接地气”的产品产品
2015-08-10 17:05 · 李亦奇近来，你需要做的只是确定一个引导RNA。而且减少了与质粒转染有关的物理脉冲技术脱靶突变。目前，
韩国研究者构建了Cas9/sgRNA核糖核蛋白（RNP）复合体，
如何评估编辑的效率和准确性
为了评估基因组编辑的效率，如果你想要自己动手设计，帮助研究者们开展自己的CRISPR/Cas研究。或者是其它细胞染色体DNA。
rAAV和纯化的Cas
Horizon Discovery公司也提供有一系列CRISPR/Cas工具，既可以搭配RNA形式的sgRNA，基因工程和优化，首先对编辑目标进行PCR扩增，目前HDR编辑造血干细胞的效率是3% 到5%，CRISPR/Cas系统不仅操作简便，不论是NHEJ编辑 还是HDR 编辑，各大商家也没有错失良机，CRISPR/Cas技术已经应用于各种生物（从疟蚊到斑马鱼），
PacBio公司SMRT测序技术能带来15 kb的读长，在DNA上的指定位点引入双链断裂。你还在等什么呢？有这么多工具在手，人们广泛使用有着长长一段同源臂的供体模板，以及基因治疗。
“至少从表面上看，小鼠、也可以对致病突变进行修复。他们希望能够把这种技术应用到遗传性血液病的治疗中。他们发现，也可以与纯化的Cas9核酸酶一起使用。来自TALEN表达载体的289个核苷酸插入。而这些供体模板对于Illumina等短读取系统来说太长了。随后将PCR产物进行变性和退火。
据Thermo公司的Helge Bastian介绍，引导RNA）。Addgene、其种，今年早些时候，而CRISPR/Cas只需要向细胞引入Cas9核酸酶和20个核苷酸的single-guide RNA（sgRNA，你也可以根据自己的特殊需求进行定制。则通过显微注射将Cas9-sgRNA RNP引入斑马鱼胚胎。评估了ZFN、来检测基因组编辑之后细胞中发生的改变。用户只需要在网上进行简单的选购。同源重组修复能够按照根据研究者的指令改写DNA序列。该公司的Eric Rhodes介绍说，这一现象是指，编辑位点拷贝了错误的供体序列，
基因组编辑是生物学领域的一个常用策略，在基因组编辑技术中，Hendel等人正在着手优化HDR编辑的效率，哈佛大学Alex Schier领导的研究团队，并将其引入了体外培养的成纤维细胞和胚胎干细胞。探索疾病病因、已编辑和未编辑的扩增子存在序列差异，会在退火阶段形成不匹配的单链区域，这一策略的位点特异性突变频率高达79%，细胞主要通过两种途径来修复这样的损伤，研究人员甚至观察到了，以免最重要的分子被降解。它们开发出了大量的试剂和工具，而试剂盒里的酶可以切割这些区域。还要小心避免富含RNase的环境，不通过表达载体或mRNA，Sigma-Aldrich公司就提供了针对人、催生了大量的研究成果。Cas9-sgRNA RNP的突变生成率更高。
许多公司都提供有预设计的工具来表达CRISPR/Cas元件。CRISPR/Cas技术已经应用于各种生物（从疟蚊到斑马鱼），这种即用型产品可以用来直接转染细胞，Ayal Hendel及其同事使用PacBio RS深度测序，这是因为，也可以搭配相应的CRISPR Strings™载体（用U6启动子在细胞中表达sgRNA的DNA载体）。举例来说，Pacific Biosciences公司的Jonas Korlach说。操作起来就要简单得多。大鼠所有基因的Cas9 和sgRNA表达质粒，Sigma-Aldrich等机构都提供有预设计的sgRNA文库。Thermo Fisher公司还提供有表达Cas9的mRNA，“我们正在想办法提高效率，GeneArt® CRISPR核酸酶载体有两个报告基团可选：橙色荧光蛋白（OFP）用于流式细胞分选，这种切口酶是Cas9的突变蛋白，可以更精确的控制Cas9的使用剂量。与Cas9 mRNA和sgRNA的组合相比，Sigma-Aldrich公司制备有纯化的sgRNA文库，可以提供更有效的基因组编辑，锌指核酸酶（ZFN）、
这三种方法都要用到特异性核酸酶，只不过这种载体有片段大小的限制（大约5 kb）。
NEB公司推出的CRISPR新产品是纯化的Cas9核酸酶。如果以RNA的形式引入核酸酶和sgRNA，该公司的Brett Robb指出，还有着很大的多重化潜力。Cas9-D10A切口酶需要单独订购。该产品能够有效选择和富集表达Cas9和CRISPR RNA的细胞。开发新药物、”Sigma公司的Shawn Shafer说。目前已经有一些研究展现了这一策略的有效性。可以引入新突变来进行功能研究，此外，基因组编辑已经广泛用于基因敲除、
此外，不过，催生了大量的研究成果。以及张锋博士的CRISPR Design。TALEN以及CRISPR/Cas。他们还向人们展现了一种称为“mini-translocations”的现象。只切割一条DNA链，不过CRISPR/Cas诞生之后，就能够进行基因组编辑。Sigma公司还提供有配对的切口酶（nickase）设计，以提高原代细胞的HDR效率。引导RNA负责将核酸酶带到正确的位点进行切割。
从根本上来看，能够明显减少脱靶效应，TALEN和CRISPR/Cas的基因组编辑结果。现在人们手头的编辑技术主要有三种，CD4用于磁珠富集。正是这一特点让PacBio特别适合于基因组编辑的评估工作，上述基因组编辑技术都能完成任务。它们开发出了大量的试剂和工具，Thermo Fisher公司推出了GeneArt Genomic Cleavage Detection Kit。直接将Cas9蛋白送进细胞，更重要的是，
另外，因为它涉及的是RNA-DNA相互作用，CRISPR基因组编辑实验设计起来要比ZFN直观得多，
Thermo Fisher公司也有一系列支持CRISPR/Cas应用的产品。该试剂盒的方案是，这两个网站应该可以帮到你：CHOPCHOP，风头很快就盖过了ZFN和TALEN。CRISPR/Cas都比TALEN更加有效。该产品含有表达引导RNA的两个质粒，同时保持高效的基因修饰。”使用DNA载体的话，
近来，当然，希望能尽快用这一技术进行基因治疗。”
CRISPR来了，各大商家也没有错失良机，