3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。半胱热力12. 5、氨酸洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。试剂
3. 板条开封后剩余板条要再封好，盒使移至第二管。用说
9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。明书如此反复作对倍稀释，大鼠热力
6. 洗板：同前。同型第八管为空白对照。半胱细胞培养上清液、氨酸每次测定应同时做标准曲线。试剂从第七管中吸出300ul弃去。盒使不能用于临床诊断！用说
试剂盒组成（2-8℃保存）
| 酶标板（Coated Wells） | 96孔 | 酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate） | 12ml |
| 10×标本稀释液（Sample Buffer） | 12ml | 20×浓缩洗涤液（Wash Buffer） | 50ml |
| 标准品（Standards）：400nmol/瓶 | 2瓶 | 底物工作液（TMB Solution） | 12ml |
| 第一抗体工作液（Biotinylated Antibody） | 12ml | 终止液（Stop Solution） | 12ml |
准备试剂与收集血样
1. 收集标本：血清、
(用于血清、柠檬酸盐、配成400nmol/ml的溶液。
2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，HCY浓度与OD值成正比，板见变异系数均小于10％。OD值为纵坐标，可通过绘制标准曲线求出标本中HCY浓度。画出标准曲线。100、0nmol/ml为横坐标，3. 12、
5. 本试剂盒仅用于科研，
4. 洗板：同前。
4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。
3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。避免反复冻融。设标准管8管，形成免疫复合物连接在板上，血浆（EDTA、
8. 每孔加入100ul终止液混匀。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。将反应板充分混匀后置37℃120分钟。
结果计算与判断
1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。
试剂盒性能
1. 灵敏度：最小的HCY检测浓度小于1. 5nmol/ml。
4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）
检测程序
1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，将反应板置37℃30分钟。标准品和样品中的HCY与单抗结合，
来源：上海西唐生物科技有限公司
联系电话：021-653336395522987255229873
E-mail：westang@163. com
2. 洗涤过程很关键。6. 25、50、在第一管中加入400nmol/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul，向滤纸上印干。
7. 每孔加入底物工作液100ul，
注意事项
1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，
3. 重复性：板内、细胞培养上清液和其它生物体液内)
原理
本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。
大鼠同型半胱氨酸(HCY)ELISA试剂盒使用说明书
2011-07-27 13:59 · Cliff本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。每管加入标本稀释液300ul。
2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠HCY。加入生物素化的抗大鼠HCY，血浆、25、在坐标纸上作图，置37℃暗处反应15分钟。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。加入底物工作液显蓝色，
3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应HCY含量。
2. 标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，最后加终止液硫酸，不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。组织匀浆等尽早检测，肝素抗凝）、用抗大鼠HCY单抗包被于酶标板上，
2. 以标准品200、保持板条干燥。