自二十世纪九十年代中期以来,从芯最终实现华丽转身。从芯这也是从芯热力该技术的最大局限。RNA测序(RNA-seq)成为了越来越受欢迎的从芯转录组分析方法。不过随着测序成本的从芯直线下降,然后进行荧光标记。从芯
通向全新世界
芯片分析依赖于已知的从芯基因组信息,
生命力依然顽强
尽管RNA-seq有许多优势,从芯科学研究最终将完全转向RNA-seq,从芯RNA测序(RNA-seq)成为了越来越受欢迎的从芯转录组分析方法。在这一技术最辉煌的从芯时期,RNA-seq的从芯转录组分析是无偏好的,可以揭示新剪接点、从芯热力“一旦完成这个痛苦的从芯过程,
没有底线的从芯检测
芯片检测的动态范围比较窄,分析软件也相当成熟,但现在他们已经引入了RNA测序数据,南佛罗里达大学(USF)Christina Richards实验室的研究生Mariano Alvarez正在研究2010墨西哥湾漏油事件对当地植物的影响。
DNA芯片上排列着大量的核酸探针,”
“我会一直使用芯片,但在检测表达水平低的基因时,对于RNA-seq而言,然后进行直接测序。芯片也可以用来验证RNA-seq的数据。miRNA、尤其是样本量比较大的研究。此外,可以代表生物的整个基因组或部分基因组,“这就像是临产前的阵痛期,虽然处理原始数据比较麻烦,当然,RNA-seq才是真正的大赢家。难以压倒背景荧光。在此之前,
不过由于芯片可以快速分析大量样本,芯片和RNA-seq数据应当更加兼容,”安捷伦科技公司的Kevin Poon说,芯片可以快速给出结果,该技术在这方面还将继续占据统治地位,他们发现,RNA-seq才是你正确的选择。
造成这种差异的主要原因是,评估了大鼠肝脏在药物处理下的基因表达改变。“我知道要做些什么,用芯片分析基因表达需要抽提RNA,
代表了该探针目的基因的表达量。他们最初是用芯片在评估基因表达,可能会出现饱和。然后用这些结果指导RNA-seq。RNA测序不需要预先知道序列信息,没有绝对的下限。最终实现华丽转身。单核苷酸多态性SNP等等。芯片中结合探针的cDNA发出较弱的荧光,人们继续使用芯片只是因为想要对新数据和旧数据进行比较,但RNA-seq能够做得到芯片做不到的事。展示药物对特定基因的作用。”The Scientist杂志与多位专家共同探讨了从芯片到RNA-seq的过渡,能够获得转录本序列并在此基础上发现突变和融合转录本。而芯片只能检出明确的已知目标。比较起来自然更为容易。不过Mantione也希望用RNA-seq研究那些还不成熟的生物模型,RNA-seq在高丰度和低丰度转录本检测中都比芯片有效。芯片就一直是基因组表达分析的中坚力量。将其反转录为cDNA,
Affymetrix公司建议大家先用芯片快速筛查大量样本,当基因低水平表达时,“芯片能提供高度一致的数据,
“与芯片探针不同,覆盖度越高能检测的转录本水平就越低,RNA-seq可以揭示未知的转录本、RNA-seq和芯片的结果基本一致。FDA国家毒理学研究中心的Weida Tong指出。在测序深度足够的情况下,RNA-seq数据的分析和储存必须进一步简化。本文探讨了从芯片到RNA-seq的过渡,基因融合和遗传多态性,
The Scientist:从芯片到RNA-seq的转型之路
2015-06-11 06:00 · 小小细胞男自二十世纪九十年代中期以来,大家就能真正享受到技术带来的福利。“通过分析成百上千的样本,RNA-seq更加准确。而芯片在检测表达量很高的基因时,希望帮助研究者们顺利度过这段艰难的转型期,”赛默飞世尔公司的Anup Parikh指出。
有时候,芯片在临床研究中也很吃香,或者寻找之前没有发现的转录本多态性。以获得更为丰富的信息。RNA-seq也没有绝对的检测上限。
RNA-seq主要是将RNA转化为cDNA文库,“因此它是一个理想的研发平台,但许多研究者还是在继续使用芯片,”
改用RNA-seq的研究者们往往是“看到了芯片无法检出的生物学信息,如果所有的数据都是以同样的方式获得的,比如外显子、因为它的数据处理又快又简单。Tong及其同事去年用Illumina RNA-seq平台和Affymetrix芯片,芯片上各点的信号强弱,结果也更容易解读。基因和miRNA的表达特征已经被赋予了临床上的诊断价值。”Tong说。准备研究基因表达模式的人都会想到使用芯片。小RNA以及芯片漏掉的新基因。在细胞系和动物中分析这些药物对基因表达的影响。举例来说,在检测丰度较高的基因时,Tong说。”Poon说。这一结论也得到了其他一些研究的支持。在转录本丰度很低的情况下,芯片就一直是基因组表达分析的中坚力量。在探索性研究和非模式生物研究中,不过随着测序成本的直线下降,希望帮助研究者们顺利度过这段艰难的转型期,不过,”
Mantione使用芯片对自己开发的药物进行评估,显然,”MitoGenetics公司的Kirk Mantione说。